H5N6是一種甲型流感病毒的亞型，最早于2013年在家禽中被發(fā)現(xiàn)，隨后傳播到野生鳥類和家禽群體中。人類可以通過與感染鳥類或污染表面接觸感染該病毒，病毒可通過眼睛、鼻子、口腔或吸入的方式傳播。自2014年以來，至少有94例人類感染病例，37人死亡。2021年出現(xiàn)了人類感染病例的激增，尚未發(fā)現(xiàn)人傳人的證據(jù)。

單克隆抗體作為靶向治療藥物，因其特異性強、療效顯著、毒性低，被譽為“生物導彈”，廣泛應用于多種疾病的治療，如靶向CD20的利妥昔單抗和靶向HER2的曲妥珠單抗已在臨床使用超過20年。在應對病毒性傳染病上，具有中和作用的單克隆抗體可以特異性中和病毒，阻止其進入細胞并增殖，既可用于高危人群的短期預防，也可用于感染后的治療，因此在禽流感的預防和治療中具有重要應用前景。

2024年10月15日星期二，國際權(quán)威期刊《Nature Communications》在線發(fā)表了中國科學院微生物研究所和深圳市第三人民醫(yī)院的聯(lián)合科研論文。研究報道了一個全人源的單克隆抗體18_14D，該單抗特異性靶向H5N6禽流感的神經(jīng)酰胺酶(N6)，能夠有效保護小鼠免受H5N6禽流感病毒感染。

研究人員從感染H5N6禽流感病毒的康復患者血清中分離出外周血單核細胞（PBMC），并通過流式細胞術(shù)分離得到表達N6特異性IgG的記憶B細胞。隨后，經(jīng)過B細胞測序和表達，成功獲得了抗N6特異性單克隆抗體。

研究人員利用生物膜干涉技術(shù)（BLI）測定了18_14D Fab對H5N6禽流感病毒神經(jīng)氨酸酶（N6）頭結(jié)構(gòu)域四聚體和單體的親和力，分別為26 nM和18 nM。然而，18_14D并不能抑制H5N6禽流感病毒的復制。細胞實驗顯示，18_14D對人類和小鼠的Jurkat細胞具有較強的抗體依賴的細胞介導的細胞毒性（ADCC）活性。

圖1. 體外實驗顯示，18_14D對N6有強親和力和較高ADCC活性，但是沒有病毒抑制活性

研究人員在小鼠模型中進一步研究了18_14D IgG對H5N6禽流感病毒的預防和治療效果。在使用20 mg/kg劑量進行預防性治療時，所有6只小鼠均存活；而在5 mg/kg和1 mg/kg劑量下，分別有5只小鼠存活。感染后48小時給予18_14D進行治療，結(jié)果顯示該抗體提供了部分保護，在5 mg/kg和20 mg/kg組中，分別有1只和3只小鼠存活。進一步研究發(fā)現(xiàn)，18_14D LALA變體使小鼠體重明顯下降，僅有3只小鼠存活。結(jié)果表明，18_14D主要通過抗體依賴的細胞介導的細胞毒性（ADCC）功能保護小鼠免受H5N6病毒感染。

圖2. 小鼠體內(nèi)攻毒實驗顯示，18_14D依靠ADCC活性對小鼠預防和治療起作用

該研究為H5N6禽流感的治療和預防提供了一個有希望的新方法，開發(fā)的單克隆抗體18_14D顯示了通過抗體依賴的細胞介導的細胞毒性（ADCC）機制來保護小鼠免受H5N6感染的潛力。這項工作進一步證明了單B細胞抗體制備技術(shù)在高效開發(fā)針對特定病原體的抗體方面的巨大優(yōu)勢。