在我們進行重組蛋白表達時，很多時候沒辦法一次性成功，往往會遇到各種各樣的問題。比如，重組蛋白純化后沉淀的情況，一般來說，蛋白都會懸浮在溶液中，為什么會出現(xiàn)沉淀的情況呢?今天普健生物就蛋白純化后沉淀的現(xiàn)象和大家具體分析分析。

　　其實就發(fā)生情況來說，在鎳離子親和純化蛋白時，蛋白沉淀的現(xiàn)象發(fā)生最多，主要原因如下：

　　1、在純化過程中出現(xiàn)鎳離子脫落的情況，而鎳離子屬于重金屬，其會造成蛋白凝聚后沉淀的情況;

　　2、制備的溶液不符合蛋白的特性。換句話說，我們配置的溶液不達標，使得蛋白無法更好地溶解于溶液中，自然會析出;

　　3、還是溶液的環(huán)境影響，所配置的溶液的PH值里蛋白的等電點太過接近，一般這個時候的蛋白都比較容易出現(xiàn)沉淀情況;

　　4、溫度因素。在4度的環(huán)境下，蛋白溶液容易滋生細菌等微生物，長時間可能會造成蛋白性質(zhì)變化或降解，最終造成沉淀;

　　5、反復凍融。多次對半百進行冰凍和融化會造成蛋白結構的傷害，造成蛋白不溶;

　　當然了，重組蛋白出現(xiàn)沉淀的情況，并不是說蛋白就失去活性了，通過一定的手段，可以讓蛋白重新溶解并使用。那么，如何解決蛋白沉淀的情況呢?

　　1、在使用鎳柱純化蛋白的時候，適當加入一些EDTA，通過其消除脫落下來的鎳離子，從而減少其對蛋白的上傷害;

　　2、加入分散劑，減少蛋白分子之間的碰撞;

　　3、加入蛋白保護劑，防止蛋白的降解;

　　4、計算出蛋白的等電點，然后在配置溶液的時候，盡量避開這個等電點;

　　5、控制好溫度，避免蛋白的熱損;

　　6、對于那些難以單獨純在的蛋白，可以添加一些輔助蛋白，讓其維持在一個很好的構象內(nèi);

　　7、特殊情況特殊對待，針對不同的蛋白，使用不同的保存方法;

　　總的來說，我們在進行重組蛋白制備的時候，不僅要做好相應的制備方案，蛋白的保存方案也需要做好，這樣才能為客戶提供更好的蛋白產(chǎn)品。盎然了，隨著更多新型蛋白的出現(xiàn)，其發(fā)生沉淀的原因也會越來越多，我們需要根據(jù)蛋白的特性，調(diào)整相應的防沉淀措施。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白制備服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。