抗體測序在生物行業(yè)中的使用非常的廣泛,它不僅能幫我們更好地進出抗體生產(chǎn),也能在極大程度上保障不同批次抗體之間的一致性。不過對于單克隆抗體測序大家又了解多少呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。
總的來說,單克隆抗體測序和普通的抗體測序不存在太大的區(qū)別,通過對單克隆抗體蛋白進行從頭到尾的測序,也就是我們常說的單克隆抗體從頭測序操作(很多人會在這里提出這個概念,似乎更高大上,其實就是同一樣操作)。
單克隆抗體測序的原理其實就是通過酶解技術(shù)結(jié)合分辨率的質(zhì)譜和獨特的數(shù)據(jù)分析來進行相關(guān)序列檢測活動,簡單來說,就是是通過檢測串聯(lián)質(zhì)譜中兩個片段離子之間的質(zhì)量差來確定蛋白氨基酸殘基的質(zhì)量,然后再沿著蛋白的主鏈來確定每個氨基酸,最終獲得氨基酸完整序列的方式。
單克隆抗體測序的主要流程是什么呢?
1、全序列覆蓋。在進行抗體測序的過程中,我們需要確保每個位點的氨基酸有超過10個不同肽段的支持,通過對氨基酸質(zhì)量的控制,確保每個質(zhì)譜里都有強力自片段峰證據(jù),這樣才能保證全序列覆蓋;
2、抗體質(zhì)量核對。對輕重鏈進行測定,確保其在范圍內(nèi);
3、亮氨酸和異亮氨酸確定。通過采用一種集成的策略,統(tǒng)計同源性數(shù)據(jù)的方式,區(qū)分亮氨酸和異亮氨酸;
單克隆抗體測序的原理其實并沒想象中的那么復(fù)雜,但是在日常的測序?qū)嶒炛?,往往會遇到這樣或是那樣的問題,最終導(dǎo)致測序結(jié)果不理想。其實出現(xiàn)這類偏差的原因有很多,主要是因為一些細節(jié)方面的操作沒做好,如果能嚴格按照步驟,控制好實驗中的每個因素,序列測量自然完全不是問題了。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供單克隆抗體測序服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。