細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)在蛋白抗體制備的一種常用方法，而且隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，細(xì)胞轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常用工具。而且在基因功能、基因調(diào)控等方面有著廣泛的使用。那么，具體什么是細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)?它的原理和特點(diǎn)都有哪些呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。

　　什么是細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)?

　　所謂的細(xì)胞轉(zhuǎn)染，其實(shí)就是將外源分子導(dǎo)入到真核細(xì)胞內(nèi)，通過(guò)這些外源細(xì)胞來(lái)該表真核細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)能力的一種技術(shù)。

　　使用細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)的目的是什么?

　　細(xì)胞轉(zhuǎn)染的主要目的就是研究基因的功能和基因的產(chǎn)物，對(duì)細(xì)胞中的一些表達(dá)進(jìn)行抑制或增強(qiáng)，控制細(xì)胞內(nèi)蛋白產(chǎn)生。

　　轉(zhuǎn)染為什么分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染?

　　所謂的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的主要區(qū)別其實(shí)就是其是否需要將外源核酸整合到宿主染色體上;

　　瞬時(shí)轉(zhuǎn)染：不用將外源基因整合到宿主染色體中，通常這個(gè)情況只維持幾天，多用于啟動(dòng)子和其他調(diào)控元件的分析;

　　穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：將外源基因整合到宿主染色體中，也可以作為一種游離體存在，通過(guò)一些選擇標(biāo)記，從而得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細(xì)胞系;

　　那么，有哪些轉(zhuǎn)染方法及其應(yīng)用呢?

　　1、磷酸鈣法。通過(guò)磷酸鈣DNA復(fù)合物吸附細(xì)胞膜，通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)染。但是不適合用于原代細(xì)胞，雖然操作簡(jiǎn)便，但是重復(fù)性差;

　　2、電穿孔法。通過(guò)高脈沖電壓破壞細(xì)胞膜電位，使得DNA通過(guò)膜小孔進(jìn)入。但是容易造成細(xì)胞死亡，DNA和細(xì)胞用量大，而且需要根據(jù)不同細(xì)胞的類(lèi)型進(jìn)行電穿孔實(shí)驗(yàn);

　　3、陽(yáng)離子脂質(zhì)體法。通過(guò)將帶正點(diǎn)的脂質(zhì)體與核酸帶浮點(diǎn)的磷酸基團(tuán)形成的復(fù)合物形成細(xì)胞內(nèi)吞。這個(gè)方法適用性較廣，重復(fù)性好，但是轉(zhuǎn)染的時(shí)候需要去除血清，且轉(zhuǎn)染后細(xì)胞類(lèi)型變化較大;

　　4、病毒介導(dǎo)法。通過(guò)侵染宿主的病毒將外源基因整合到染色體中。對(duì)于那些難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞來(lái)說(shuō)，這個(gè)方法非常合適，但是所攜帶的基因不宜太大，且細(xì)胞需處于分裂期;

　　5、基因槍法。通過(guò)重金屬吸附DNA，將其用彈道射入細(xì)胞，使得其隨著DNA在細(xì)胞內(nèi)釋放、表達(dá)。使用范圍相對(duì)來(lái)說(shuō)較廣;