之前我們和大家介紹過(guò)有關(guān)磷酸化抗體和傳統(tǒng)抗體之間的區(qū)別,相信大家對(duì)抗體磷酸化有了一定的了解。今天,普健生物在這里和大家具體聊聊有關(guān)磷酸化單克隆抗體制備的各個(gè)階段及其相關(guān)內(nèi)容。
第一階段:設(shè)計(jì)合成磷酸化多肽。通過(guò)相關(guān)磷酸化手段獲得磷酸化多肽,對(duì)于不同的磷酸化設(shè)計(jì)來(lái)說(shuō),磷酸化的方式也是各不相同的,需要結(jié)合實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行選擇;
第二階段:多肽的偶聯(lián)。通過(guò)化學(xué)偶聯(lián)法等方法將多肽偶聯(lián)到抗原上,形成我們所需的半抗體;
第三階段:免疫與檢測(cè)。將所得半抗體注入到所選動(dòng)物體內(nèi),而后通過(guò)定時(shí)多次注入,讓機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng);
第四階段:細(xì)胞融合。將磷酸化多肽顯示出最佳免疫效果的細(xì)胞與骨髓瘤進(jìn)行融合,獲得相應(yīng)的雜交瘤細(xì)胞;
第五階段:細(xì)胞增殖與細(xì)胞篩選。對(duì)細(xì)胞進(jìn)行增殖培養(yǎng)和篩選服務(wù),從中找出合適的細(xì)胞并將其培養(yǎng)成我們所需的數(shù)量;
第六階段:腹水制備及抗體純化。選擇合適的宿主,進(jìn)行腹水制備,并通過(guò)抗體純化的方式,提取出我們所需的抗體;
第七階段:抗體檢測(cè)。對(duì)所得抗體進(jìn)行功能和活性等方面的檢測(cè);
其實(shí)大家不難看出,磷酸化單克隆抗體制備的過(guò)程和普通單克隆抗體制備的過(guò)程是較為類(lèi)似的,只是說(shuō)需要對(duì)抗原進(jìn)行相應(yīng)的磷酸化操作。當(dāng)然了,操作復(fù)雜一些,需要注意的事項(xiàng)也相對(duì)更多一些。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供磷酸化單克隆抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。