在我們進行蛋白表達時,常常會加入一些肽類和蛋白,使得其與目的蛋白融合表達,以便于我們進行進一步的檢測、跟蹤和純化。這類肽類和蛋白,我們稱之為標(biāo)簽蛋白(也叫蛋白標(biāo)簽)。一般來說,蛋白標(biāo)簽對蛋白本身并不會起到太大的作用,但是能夠為我們蛋白表達的過程提供相關(guān)佐證。
蛋白標(biāo)簽的具體作用:
1、識別。通過給蛋白添加一些易于識別的標(biāo)簽,以達到快速鑒定目的蛋白的目的;
2、跟蹤。通過定位標(biāo)簽確定蛋白在細胞中的位置,進而了解其生理功能和信號通路等;
3、定量。通過標(biāo)簽來確定蛋白的量;
4、純化。通過識別標(biāo)簽來對蛋白進行相關(guān)純化工作;
常見的標(biāo)簽蛋白及其特點:
1、his標(biāo)簽。其特點是分子量小,不會影響到蛋白的理化性質(zhì),免疫原性低,主要用于蛋白純化;
2、FLAG標(biāo)簽。其特點是分子量小,不會改變?nèi)诤系鞍坠δ埽幸粋€腸激酶切割位點,以便于標(biāo)簽的去除。主要用于免疫沉淀、免疫熒光以及ELISA制備;
3、GST標(biāo)簽。特點是可用于增加外源蛋白可溶性,在大腸桿菌中科實現(xiàn)大量表達,特異性高,純化方便;可用于蛋白純化、酶學(xué)分析以及免疫分析;
4、c-Myc標(biāo)簽。特點是以人Myc基因的一部分而盡量避免人源細胞的相關(guān)實驗。主要用于WB、免疫沉淀、免疫熒光以及流式細胞術(shù)等;
5、HA標(biāo)簽。特點是對外源蛋白空間結(jié)構(gòu)影響小,容易構(gòu)成標(biāo)簽蛋白。主要用于蛋白純化、ELISA以及免疫沉淀等;
當(dāng)然了,雖然說很多標(biāo)簽都適用于蛋白純化等操作,但是也要結(jié)合實際情況來進行選擇,這樣不僅能提升蛋白制備的成功率,也能在更大程度上滿足標(biāo)簽蛋白的需求,當(dāng)然了,制備成本也能得到很好的控制。武漢蒲建設(shè)橫五專業(yè)為廣大用戶提供蛋白制備服務(wù),如果您有香瓜需求,歡迎來電咨詢。