昆蟲表達系統(tǒng)相信大家都不會陌生，它是四大蛋白表達系統(tǒng)之一(主要包含：原核細胞表達系統(tǒng)、酵母表達系統(tǒng)、昆蟲表達系統(tǒng)以及哺乳動物表達系統(tǒng))。關(guān)于昆蟲表達系統(tǒng)我們在前面和大家簡單介紹過，今天我們再和大家具體聊聊有關(guān)昆蟲表達系統(tǒng)的優(yōu)缺點及其詳細的制備步驟。

　　昆蟲表達系統(tǒng)的優(yōu)點：

　　1、能夠輕松時間糖基化、乙?；?、磷酸化等翻譯修飾操作;

　　2、分子特性相對簡單，使得其操作起來更加的簡單;

　　3、因為其細胞能夠懸浮生長，使得其培養(yǎng)起來更加的簡單;

　　4、對于外源基因能夠?qū)崿F(xiàn)高效表達且其繁殖不受外源基因影響;

　　昆蟲表達系統(tǒng)的步驟：

　　1、引物設(shè)計與合成

　　選擇合適的基因序列，并將目的基因引入到序列中;

　　2、基因擴增與克隆

　　通過所得RNA進行反轉(zhuǎn)率，合成我們所需的cDNA，并以cDNA為模板，對其進行擴增和測序;

　　3、病毒質(zhì)粒構(gòu)建

　　將擴增所得基因克隆到質(zhì)粒中，并對其進行培育、擴增;

　　4、表達蛋白

　　通過設(shè)計合理的表達環(huán)境，對所得基因序列進行表達，獲得蛋白表達產(chǎn)物的混合液;

　　5、蛋白純化及鑒定

　　通過蛋白純化的手段對蛋白進行提取和純化，并對純化后的蛋白進行鑒定，以測定所得蛋白是否符合我們需求;

　　大家應(yīng)該不難看出，昆蟲表達系統(tǒng)和其他表達系統(tǒng)的表達步驟之間并不存在太大的差別，只是在選擇宿主方面存在著不同，其他步驟大概類似。但是，想要表達成功，則有很多細節(jié)方面需要引起注意，而恰恰是這些細節(jié)制約著所得蛋白是否能夠滿足需求。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供昆蟲表達蛋白服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。

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