在我們使用大腸桿菌表達(dá)重組蛋白時(shí)，我們需要確定其的產(chǎn)生、定位、培養(yǎng)基以及產(chǎn)量進(jìn)行確定，以便于其后期簡化工作的進(jìn)行。所以，我們不僅需要對蛋白、培養(yǎng)液等物質(zhì)進(jìn)行小規(guī)模地分析。對于那些分析出來有利于誘導(dǎo)的條件進(jìn)行保留，并選擇合適的方法對其進(jìn)行目的蛋白純化。

　　如何對重組蛋白的生長和誘導(dǎo)?

　　1、按需求準(zhǔn)備pET重組子培養(yǎng)液。直接從經(jīng)辦或甘油保存菌中提取一些細(xì)胞加入到抗生素培養(yǎng)液中;

　　2、在37度環(huán)境下對培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。提取3ml培養(yǎng)液，并將其加入到含有抗生素的100ml培養(yǎng)液中;

　　3、在搖床上進(jìn)行無菌培養(yǎng)。在適當(dāng)溫度下降培養(yǎng)基放在搖床上培養(yǎng)2-3小時(shí)，在培養(yǎng)過程中要不定期地提取樣品進(jìn)行檢測;

　　4、分批次培養(yǎng)。在進(jìn)行誘導(dǎo)之前，需要將培養(yǎng)液分成兩份，一份加入IPTG，另一份不加，通過對照，看其具體差異。然后，保持其在適當(dāng)溫度下進(jìn)行培養(yǎng);

　　總的來說，重組蛋白進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)時(shí)，不僅要測試好相應(yīng)的培養(yǎng)環(huán)境，更是需要進(jìn)行不同批次的檢測和對比，這樣才能保證最佳的制備環(huán)境。當(dāng)然了，對于不同的蛋白，需要提供不同的環(huán)境，這樣才能在更大程度上保證蛋白的表達(dá)。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白表達(dá)服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。