GST pull-down實(shí)驗(yàn)是一個(gè)有效驗(yàn)證酵母雙雜交系統(tǒng)的體外試驗(yàn)技術(shù)。將靶蛋白質(zhì)-GST融合蛋白質(zhì)親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上，作為與目的蛋白質(zhì)親和的支撐物，充當(dāng)“誘餌蛋白質(zhì)”，目的蛋白質(zhì)溶液過柱，可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白質(zhì) ( 目的蛋白質(zhì) )”，洗脫結(jié)合物通過SDS-PAGE電泳分離，最后經(jīng) western blot，從而檢測兩種蛋白質(zhì)間是否有相互作用。
“誘餌蛋白質(zhì)”和“捕獲蛋白質(zhì)”均可通過細(xì)胞裂解物、純化的蛋白質(zhì)、表達(dá)系統(tǒng)以及體外轉(zhuǎn)錄翻譯系統(tǒng)等方法獲得 , 此方法簡單易行 ，操作方便 。
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服務(wù)項(xiàng)目 |
客戶提供 | 服務(wù)內(nèi)容 | 服務(wù)周期 | 交付內(nèi)容 |
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GST融合蛋白的表達(dá)
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互作蛋白質(zhì)名稱、Gene ID、物種信息 誘餌蛋白質(zhì)及捕獲蛋白質(zhì)表達(dá)載體 檢測用一抗 (普健可提供) |
表達(dá)純化靶蛋白與相關(guān)誘餌蛋白（或客戶提供含有誘餌蛋白的細(xì)胞裂解上清） 體外GST pull-down實(shí)驗(yàn) |
3-4周 |
PAGE圖片 western blot原始圖片及鑒定結(jié)果 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 |
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In vitro GST pull down |
1-2周 |
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Western blot檢測 |
1周 |
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