現(xiàn)階段,除了需要應對某些特別病毒(比如新冠剛出現(xiàn)之時),市面上所擁有的重組蛋白產品基本上都能夠滿足我們的需求了。只要我們提出需求,結合需求尋找產品,基本上都能夠找到能夠一用的產品。但是,又有一些用戶禁不住要問了:你們的蛋白保質期多久?你們的蛋白為什么是凍干的?凍干的蛋白如何重構等等。今天,普健生物就在這里和大家具體聊聊。
1、重組蛋白為什么要做成凍干樣式?
其實我們知道,大部分重組蛋白對溫度非常的敏感,即便是在制備過程中溫度提升都有可能造成表達量降低或蛋白析出的情況,所以,只有使用凍干的方式來保留大部分蛋白的活性。為什么說大部分?因為畢竟出現(xiàn)了一次操作,一小部分的蛋白也會因此失去活性。同時,凍干粉的保存時間更長,運輸費用也相對會降低;
2、重組蛋白凍干前會不會加什么保護劑?
在對蛋白進行凍干之前,我們都會向其中添加保護劑,比如糖類、多元醇、聚合物、表面活性劑、某些蛋白和氨基酸。這類保護劑不僅能夠更好地進行凍干,也能更好地對蛋白進行保護,降低其失活率;
3、為什么買的管內幾乎看不到蛋白?
其實最開始我也覺得很奇怪,為什么看到冰柜里面凍著一些空管?其實我們在對蛋白進行凍干時,更多的蛋白附著在管壁內側,形成了一層很薄或肉眼不可見的蛋白層,乍看之下確實像是個空管;
4、凍干粉如何重構蛋白?
其實在說明書中都會附著一份凍干粉的使用說明,里面會詳細介紹有關重構的方法。當然了,一般情況下我們可以選擇無菌水來進行復溶,加入等體積的無菌水,輕輕搖晃即可。切記,千萬不可渦旋;
5、什么是載體蛋白?
其實就是類似保護劑,用于提高蛋白的穩(wěn)定性,有助于其能夠更好地附著在瓶壁上;
6、得到重組蛋白后要如何保存?
重組蛋白到我們手里了,但是不是現(xiàn)用,要怎么保存呢?其實說明書上有它的保存方式,按照這個溫度進行保存即可。當然了,如果已經復溶,那就需要對其進行分裝,并在-20度的環(huán)境下保存;
PS:大部分的蛋白的保質期只有一年,需要將其放置在最佳保存溫度下,同時盡量不要反復凍融;
7、所得重組蛋白的數(shù)量要如何確定?
采用不同的測定方式,所得蛋白含量的差異會很大,我們通常會采用BCA、SDS-PAGE等方法進行檢測;
如上,基本上就能解答我們需要使用蛋白的各種問題,當然了,特殊蛋白肯定需要特殊對待,不過結合說明書,也基本上不會存在什么問題。當然了,結合需求沒有找到合適的產品時,我們就需要進行重組抗體定制服務,這樣才能獲得我們所需功能的蛋白產品。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白制備服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。
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